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BENEFICI SISTEMA URINARIO

BENEFICI SISTEMA IMMUNITARIO

Prevenire l’influenza con il mirtillo rosso Oximacro® – Importante scoperta dei Biologi dell’Università di Torino | Università di Torino

(PDF) Proprietà antivirali del mirtillo rosso americano (Vaccinium macrocarpon Aiton) contro Herpes simplex e Influenza (H1N1)

ATTIVITÀ ANTIVIRALE CONTRO L’INFLUENZA (H1N1)

I virus dell’influenza di tipo A e di tipo B (IAV, IBV) sono patogeni principali diffusi tra le popolazioni umane e sono responsabili di epidemie stagionali e pandemie. Le epidemie influenzali annuali causano in tutto il mondo 3-5 milioni di casi di malattie gravi e fino a mezzo milione di morti tra i gruppi ad alto rischio, con un impatto ancora maggiore nei paesi in via di sviluppo. La difesa contro le infezioni da virus dell’influenza (IV) pone ancora una serie di sfide. L’attuale arsenale antivirale contro i virus dell’influenza è in effetti limitato; pertanto, lo sviluppo di nuove strategie anti-influenzali efficaci contro virus antigenicamente diversi è una priorità urgente. Oximacro® inibisce la replicazione dei virus dell’influenza A e B (IAV, IBV) in vitro a causa del suo elevato contenuto di dimeri e trimeri di proantocianidine di tipo A (PAC-A).

Oximacro® e le sue PAC-A inibiscono la replicazione IAV e IBV

Oximacro® inibisce la replicazione di IAV e IBV in cellule MDCK in modo dipendente dalla concentrazione. I valori IC50 sono rispettivamente 4,5 ± 0,2 μg/ml per IAV e 4,5 ± 0,5 μg/ml per IBV. La concentrazione citotossica al 50% (CC50) è di 141 ± 0,8 μg/ml, indicando quindi che l’attività antivirale di Oximacro® non derivava da una citotossicità aspecifica. L’indice di selettività per IAV e IBV (CC50/IC50) risulta quindi rispettivamente di 31.1 e 31.3.

Anche contro il virus dell’influenza SOLO le PAC-A di Oximacro® hanno azione antivirale

Per individuare la frazione chimica di Oximacro® responsabile della sua attività inibitoria, sono stati eseguiti saggi antivirali con frazioni purificate ottenute mediante frazionamento di Oximacro® (vedi sopra). L’analisi dell’attività anti-IV delle frazioni ha identificato le frazioni 3 e 4 come aventi attività inibitoria nei confronti di IAV e IBV, indicando quindi che i componenti responsabili dell’attività antivirale di Oximacro® sono solo ed esclusivamente le PAC-A.

Oximacro® agisce nelle fasi iniziali del ciclo di riproduzione del virus dell’influenza

Per capire il meccanisco d’azione di Oximacro®, sono state infettate cellule MDCK con IAV o IBV in presenza di diverse concentrazioni di Oximacro® per 2 ore a 4 ° C, in modo da consentire l’attacco di particelle IV, ma non il loro ingresso nelle cellule bersaglio. Oximacro® ha inibito l’attacco di IAV e IBV in modo dipendente dalla concentrazione (Figura A). Successivamente, per indagare l’attività inibitoria di Oximacro® sull’ingresso IV, monostrati di MDCK sono stati infettati con IV a 4 ° C per 2 ore per consentire l’attacco virale ma non l’ingresso. Sono state quindi aggiunte diverse concentrazioni di Oximacro® e le colture infette sono state incubate a 37 ° C per 2 ore per consentire l’ingresso di particelle IV adsorbite. Oximacro® ha impedito l’ingresso di IAV e IBV in modo dipendente dalla concentrazione (Figura B). Questi risultati dimostrano che Oximacro® è in grado di interferire sia con l’adesione virale sia con l’ingresso del virus nelle cellule, suggerendo quindi la sua idoneità come inibitore ad azione precoce della replicazione del virus dell’influenza.

Oximacro® interferisce con l’emoagglutinina del virus dell’influenza

L’emoagglutinina (HA) del virus dell’influenza è responsabile sia dell’adesione che dell’ingresso del virus mediando sia l’interazione iniziale con i recettori cellulari contenenti acido sialico, sia la fusione tra le membrane endosomiche e l’involucro virale. Oximacro® è in grado di interagire con l’HA in modo dipendente dalla concentrazione e dal tempo e le interazioni tra Oximacro® e HA possono ostacolare le sue funzioni virali di adesione e ingresso del virus essendo alla base dell’attività antivirale complessiva di Oximacro®. Per identificare ulteriormente il meccanismo di interazione tra HA e le PAC-A di Oximacro®, sono state eseguite simulazioni di docking in silico. Utilizzando la struttura cristallina di HA (A / Porto Rico / 8/1934, ID PDB: 1RU7) del ceppo virale di influenza testato, l’analisi di docking ha rivelato che i dimeri PAC-A di Oximacro® si legano prima alle scanalature interne della struttura HA (Figura A, sinistra pannello), e successivamente alla superficie della struttura HA (Figura A, pannello di destra). La migliore posa di legame è mostrata nella Figura B, dove sono evidenziati i residui di HA (PHE 299, TRP 234 e ASN 210) che formano legami di idrogeno con i dimeri di PAC-A di Oximacro®.

Complessivamente, il meccanismo di azione descritto di Oximacro® contro il virus dell’influenza sostiene la sua potenziale applicazione come supporto per le infezioni influenzali.
Per una descrizione completa dei metodi e dei risultati si rimanda al documento:

LUGANINI, A., TERLIZZI, M.E., CATUCCI, G., GILARDI, G., MAFFEI, M.E., GRIBAUDO, G. (2018)
The cranberry extract Oximacro® exerts in vitro virucidal activity against influenza virus by interfering with hemagglutinin. 
Frontiers in Microbiology, 9: 1826